Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test

Acque reflue non trattate che non è stato sottoposto a depurazione chimica.

Il Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test è un test di reazione a catena della polimerasi (RT-qPCR) inversa in tempo reale che rileva e quantifica l’RNA del virus in un campione concentrato di acque reflue debitamente preparato per l’analisi.

Se utilizzato con un protocollo di concentrazione da 105 ml, la più bassa concentrazione di SARS-CoV-2 che può essere rilevata dal Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test reflue è di circa 1 copia del gene/1 ml.

Il protocollo validato da IDEXX concentra il virus SARS-CoV-2 da 105 ml di acque reflue. Con sistemi di centrifugazione appropriati, il personale di laboratorio può analizzare volumi più o meno grandi eseguendo la procedura di base adattata per diversi volumi di input.

Il test RT-PCR per il SARS-CoV-2 analizza 5 µl di RNA estratto preparato da un campione concentrato di acque reflue, sebbene si consigli di avere a disposizione un volume aggiuntivo per tenere conto della perdita nel pipettaggio e per disporre di duplicati del campione.

Il protocollo validato da IDEXX concentra il campione di acque reflue utilizzando una combinazione di centrifugazione e precipitazione con polietilenglicole (PEG) e può essere modificato per soddisfare le esigenze specifiche del laboratorio. Inoltre, possono essere utilizzati altri metodi di concentrazione come l’ultrafiltrazione, la filtrazione a collettore, ecc. Questi metodi devono essere validati per verificarne il funzionamento in termini di performance.

Mantenere il campione a basse temperature contribuisce a prevenirne la degradazione e a garantire la precipitazione efficiente del virus SARS-CoV-2.

Il Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test è stato validato per l’utilizzo con il kit a biglie magnetiche per DNA e RNA nell’acqua per l’estrazione di acidi nucleici da un concentrato di acque reflue, incluso l’RNA del virus SARS-CoV-2. Il kit a biglie magnetiche può essere impiegato manualmente o con un processatore magnetico automatizzato. Per ulteriori dettagli, consultare il foglio illustrativo del prodotto.

Per ogni set di campioni di acque reflue testate con il Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test, devono essere analizzati contemporaneamente un controllo positivo di PCR, un controllo negativo di PCR, un controllo positivo di estrazione e un controllo negativo di estrazione. Inoltre, è opportuno eseguire un controllo sul metodo per verificare i risultati previsti.

Per le condizioni di conservazione raccomandate al momento della ricezione del prodotto e in seguito a ricostituzione/primo utilizzo, si prega di consultare il foglio illustrativo.

I Centri per la prevenzione e il controllo delle malattie statunitensi (Centers for Disease Control and Prevention, CDC) indicano che per l’analisi di campioni ambientali, compresi la manipolazione e il trattamento di campioni di acque reflue associati al virus SARS-CoV-2, è possibile avvalersi di un laboratorio di livello di biosicurezza 2 (BSL-2) che adotti precauzioni aggiuntive. È disponibile una guida specifica in lingua inglese redatta dai CDC statunitensi: Interim Laboratory Biosafety Guidelines for Handling and Processing Specimens Associated with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19).⁴

Per raccomandazioni specifiche consultare le autorità sanitarie locali.

Si prega di seguire le procedure raccomandate dalle autorità sanitarie locali per la manipolazione e il trattamento dei campioni di acque reflue associati al virus SARS-CoV-2. I CDC statunitensi hanno pubblicato una fonte per maggiori informazioni: Interim Laboratory Biosafety Guidelines for Handling and Processing Specimens Associated with Coronavirus Disease 2019 (COVID-19).⁴

Si prega di attenersi alle normative e alle linee guida in materia di sicurezza stabilite a livello locale. 

Se ritenuto opportuno, è possibile utilizzare un processo di trattamento termico facoltativo per inattivare i campioni mediante pastorizzazione. Per un esempio, consultare il foglio illustrativo del prodotto. 

Una fase di pastorizzazione può ridurre il rilevamento dell’RNA del virus SARS-CoV-2. Per ulteriori informazioni si prega di contattare un rappresentante IDEXX.

Smaltire tutti i campioni e i materiali in conformità con le linee guida e le normative locali.

Il Water SARS-CoV-2 RT-PCR Test non dispone dell’approvazione dell’EPA per i test di rilevamento del virus SARS-CoV-2 nelle acque reflue. Attualmente, l’EPA non regolamenta i test per la rilevazione del virus SARS-CoV-2 nelle acque reflue né approva relativi metodi di analisi. I test per il SARS-CoV-2 nelle acque reflue possono essere regolamentati o meno dalle autorità locali e/o statali. È opportuno informarsi sulle disposizioni eventualmente vigenti nel proprio paese.